IAP细胞凋亡抑制因子ELISA试剂盒
试剂盒性能:
1. 特异性高:由于是抗原抗体的特异性结合,因此试验的特异性很高,能够排除其他物质的干扰。
2. 灵敏度高:细胞凋亡抑制因子试剂盒由于酶的放大作用,使得试验的灵敏度大大提高,能够检测出微量的抗原或抗体。
3. 操作简便:ELISA试验操作相对简单,容易掌握,适合于大规模样本检测。
4. 适用范围广:可以用于检测各种抗原、抗体和激素等生物分子。
操作步骤:
ELISA试剂盒怎么选择?
01 灵敏度
IAP 试剂盒灵敏度—试剂盒对于被检物质的低检测能力,如果我们待检物质浓度量很低,可以选择高灵敏的试剂盒。灵敏度取值为空白对照的标准差对应的浓度值的3倍。
02 特异性
上海特异性—判断其他分子与试剂盒抗体的结合能力。交叉反应越小,试剂盒的特异性越好。一般需要衡量试剂盒与当前种属同家族蛋白和其它种属该蛋白、血清中常见因子(如异嗜性抗体、类性因子等)、靶蛋白互作蛋白无交叉反应。
03 精密性
细胞凋亡抑制因子ELISA精密性—也叫重复性,是对同一样品重复测定时误差大小的评估参数。一般要求板间及板内精密性控制在10%以内。菲恩生物使用全机器生产,排除人工的不稳定性,依靠电子移液枪和自动包板机加样,严格控制批内差批间差。
04 准确度
酶联ELISA试剂盒准确度—一般通过加标(spike-in)回收率来衡量,回收率在80%-120%之间为合格。通过添加标准品到天然样本基质内进行测定,以不添加标准品的天然样本基质为空白对照,回收率数值为靶标的测定浓度与添加的标准品浓度比值,以百分比计。回收率偏高或偏低会产生假阳性或假阴性结果,影响测定值的准确性。
05 线性
线性 —在天然样本基质中添加有适当浓度的标准品,分别稀释2倍、4倍、8倍来检测,测定各浓度下的回收率,回收率在80%-120%之间为合格。
06 稳定性
稳定性—一般以加速破坏性实验进行验证,将未拆封的试剂盒在37°C和2-8°C分别放置一定时间,ELISA检测试剂盒考察各项性能指标的偏差,以偏差小于10%为合格。稳定性越好,试剂盒存储时间越长。
ELISA的基本原理有三条:(1)抗原或抗体能以物理性地吸附于固相载体表面,可能是蛋白表面间的疏水性部分相互吸附,并保持其学活性; (2)抗原或抗体可通过共价键与酶连接形成酶结合物,而此种酶结合物仍能保持其学和酶学活性;(3)酶结合物与相应抗原或抗体结合后,可根据加入底物的颜色反应来判定是否有反应的存在,而且颜色反应的深浅是与标本中相应抗原或抗体的量成正比例的,因此,可以按底物显色的程度显示试验结果。由于ELISA法一方面是建立在抗原与抗体学反应的基础上,因而,具有特异性。而另一方面又由于酶标记抗原或抗体是酶分子与抗原或抗体分子的结合物,它可以催化底物分子发生反应,产生放大作用,正因为此种放大作用而使本法具有很高的敏感性。因此,ELISA法是一种既敏感又特异的方法。
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