影响ELISA试剂盒实验的因素
一、试剂盒
1、抗原、抗体活性对效价的影响:主要是试剂中抗体(或抗原)的效价降低或失活,结果不易判断。再有ELISA法灵敏度高,对杂质的反应灵敏度也高,实验中空白对照OD值偏高或假阳性;
2、酶结合物浓度过高,也会导致OD值假性增高。
二、试验仪器
1、ELISA试剂盒加样器是否经过校正,酶免测定血清用血量很少,如手工加样器的性能不好,吸取样品不,会使结果忽高忽低;
2、每次洗板前,应检查洗板机针孔有无堵塞。
三、操作
1、检测前先将试剂盒从冰箱取出置室温平衡20min后使用,试剂用完及时放回冰箱冷藏,以免造成试验结果假性降低;
2、加样时注意勿触及包被板底部,以免擦伤包被物使抗体(抗原)脱落而影响实验结果的准确性;
3、洗涤不充分,会使结果假性增高,过分洗涤呈假阴性;
4、比色时应保持包被孔底部无异物、无水汽,特别是冬季板从37℃水浴箱取出时,底部留有水汽,应将板底擦干后进行比色,水汽或孔内气泡也会使OD值升高;
5、抗原与抗体反应达到完全平衡,依赖于温度与时间。温度45℃易引起失活及标记物脱落,温度低于4℃,影响反应速度。
区分ELISA试剂盒的方法:
一:选定一个检测范围内的浓度做多孔重复,可看出平行性好不好。即板内CV值的大小,此操作时需求当心加样的性。对一些制造较粗糙的试剂盒来说,板间CV值是较大的。
二:可选用已知浓度的重组细胞因子,稀释到检测范围内作为样本参加,看检测的性。
三:对用待测目标的重组细胞因子做试剂盒说明书上标定的小浓度稀释,可测出灵敏度,主张5个复孔以上才有含义。一般厂家以20个复孔做出的成果作为检测限。用此实验可验证出所购试剂盒的灵敏度是否如说明书所述,也可判别出所购试剂盒是否有夸张之说。
四:如果有相同目标的试剂盒,可用对方的标准品作为样本,分别参加各自的试剂盒做检测,以检测试剂盒的真实性,性。如其中一种是的,比较牢靠的话,可作为标准来验证另一试剂盒的程度。
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【测试种属】犬、大小鼠、人、豚鼠、兔子、牛羊、猪、鸡鸭elisa试剂盒等种属
【储存方式】:2-8℃
【检测目的】用于测定血清,血浆及相关液体等样本。例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本。
【用途】科研实验,不用于临床诊断。
BUNSEN本生elisa试剂盒是一种敏感性高、特异性强、重复性好的实验诊断方法,由于其试剂稳定、易保存、操作简便、结果判断较客观等因素,以及既适宜于大规模筛查试验又可以用于少量标本的检测,既可以做定性试验也可以做定量分析等优点,已广泛应用于微生物学、寄生虫学、肿瘤学和细胞因子等领域。
试剂盒内含有分析所需的所有必需试剂,操作简单便捷;试剂盒内组分经实验优化,确保更高的检测灵敏度
规格: 96T/48T
酶标仪检测波长: 450 nm
所需样本体积: 50-100ul
双赢供应种属:大小鼠、豚鼠、兔子、牛、羊、猪、鸡、植物ELISA试剂盒等
检测目的:用于测定血清,血浆及相关液体等样本。例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本。
适用范围:仅供科研
贮存方法:试剂盒未拆开,4℃保存。已拆开,标准品-20℃保存,其它4℃保存。
有效期:6个月
ELISA试剂盒产品用途:
【灵敏度高】:由于抗体联结上了酶,因此借助于酶与底物的显色反应,显示抗原与抗体的结合,大大提高了检测的灵敏性,从而使检测水平接近放射测定法。
【专一性强】:抗原和抗体的反应是专一反应,而酶技术以反应为基础,所检测的对象是抗原(或抗体),使用的抗体除标记了酶以外,与普通抗体的反应特性并无多大差别。
保质期: 2-8℃保存,切勿冷冻,有效期为六个月