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血清淀粉样蛋白A试剂盒

更新时间:2024-06-29 01:11:57 [举报]

区分ELISA试剂盒的方法:
一:选定一个检测范围内的浓度做多孔重复,可看出平行性好不好。即板内CV值的大小,此操作时需求当心加样的性。对一些制造较粗糙的试剂盒来说,板间CV值是较大的。
二:可选用已知浓度的重组细胞因子,稀释到检测范围内作为样本参加,看检测的性。
三:对用待测目标的重组细胞因子做试剂盒说明书上标定的小浓度稀释,可测出灵敏度,主张5个复孔以上才有含义。一般厂家以20个复孔做出的成果作为检测限。用此实验可验证出所购试剂盒的灵敏度是否如说明书所述,也可判别出所购试剂盒是否有夸张之说。
四:如果有相同目标的试剂盒,可用对方的标准品作为样本,分别参加各自的试剂盒做检测,以检测试剂盒的真实性,性。如其中一种是的,比较牢靠的话,可作为标准来验证另一试剂盒的程度。

Elisa试剂盒详情:
样本:血清、血浆、组织匀浆等液体样本
标记物:血清、血浆、组织匀浆等
适应物种:详见说明书
应用:可用于科研实验,不用于临床治疗
检测方法:一步法、夹心法、酶联吸附法等
储存条件:2-8℃(频繁使用时),-20℃(长时间不用时)。
有效期:6个月(4℃);12个月(-20℃)。
检测方法:酶联

操作步骤

  1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀 释。

  200ng/L

  5 号标准品

  150μl 的原倍标准品加入 150μl 标准品稀释液

  100ng/L

  4 号标准品

  150μl 的 5 号标准品加入 150μl 标准品稀释液

  50ng/L

  3 号标准品

  150μl 的 4 号标准品加入 150μl 标准品稀释液

  25ng/L

  2 号标准品

  150μl 的 3 号标准品加入 150μl 标准品稀释液

  12.5ng/L

  1 号标准品

  150μl 的 2 号标准品加入 150μl 标准品稀释液

  2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、 待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样 50μl,待测样品孔中先加样品稀释液 40μl,然后再加待测样品 10μl(样品终稀释度为 5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽 量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

  3. 温育:用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。

  4. 配液:将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用

  5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此 重复 5 次,拍干。

  6. 加酶:每孔加入酶标试剂 50μl,空白孔除外。

  7. 温育:操作同 3。

  8. 洗涤:操作同 5。

  9. 显色:每孔先加入显色剂 A50μl,再加入显色剂 B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色

  10 分钟.

  10. 终止:每孔加终止液 50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

  11. 测定:以空白孔调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止 液后 15 分钟以内进行。

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