仅供研究使用
牛可溶性内皮糖蛋白(ENG)ELISA试剂盒
酶联吸附法（ELISA）的优点包括：1.高灵敏度：ELISA可以检测出微量的抗原或，其灵敏度通常比其他学更高。2.高特：ELISA仅与特定的抗原或结合，因此不易受到其他的，具有较高的特。3.快速：ELISA操作简便、快速，可以在短时间内结果.4.易操作：ELISA实验操作相对简单，易于化和自动化，因此适合于大规模样品的检测。5.应用范围广：ELISA可以用于检测多种生物分子，如蛋白质、多肽、等，因此在医学、生物领域广泛应用。6.无放射性核素污染：与放射测定法相比，ELISA不需要使用放射性核素，因此更为安全、环保。总之，ELISA是一种高灵敏度、高特、快速、易操作的学技术，具有广泛的应用前景。
ELISA试剂盒的实验原理.ELISA试剂盒的实验原理是建立在抗原与学反应的基础上的，同时结合了酶的催化作用。其基本原理包括三个方面：1.抗原或能以物理性地吸附于固相载体表面，可能是蛋白和聚表面间的疏水性部分相互吸附，并保持其学活性。2.抗原或可通过共价键与酶连接形成酶结合物，而此种酶结合物仍能保持其学和酶学活性。3.酶结合物与相应抗原或结合后，可根据加入底物的颜色反应来判定是否有反应的存在，而且颜色反应的深浅是与标本中相应抗原或的量成正比例的，因此，可以按底物显色的程度显示试验结果。ELISA法一方面是建立在抗原与学反应的基础上，因而具有特。而另一方面又由于酶标记抗原或是酶分子与抗原或分子的结合物，它可以催化底物分子发生反应，产生放大作用，正因为此种放大作用而使本法具有很高的性。因此，ELISA法是一种既又特异的。
试剂盒操作步骤：
实验开始前，请提前配置好所有试剂，试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。每次检测都应该做曲线。如样品浓度过高时，用样品稀释液进行稀释，以使样品符合试剂盒的检测范围。
1.加样：分别设空白孔、孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120分钟。 为实验结果有效性，每次实验请使用新的品溶液。
2.弃去，甩干，不用洗涤。每孔加生物素标记工作液 100μl（取1μl生物素标记加99μl生物素标记稀释液的比例配制，轻轻混匀，在使用小时内配制），37℃,60分钟。
3.温育60分钟后，弃去孔内，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干。
4.每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液（同生物素标记工作液） 100μl，37℃，60分钟。
5.温育60分钟后，弃去孔内，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干。
6.依序每孔加底物溶液90μl，37℃避光显色（30分钟内，此时可见品的前3-4孔有明显的梯度蓝色，后3-4孔梯度不明显，即可终止）。
7.依序每孔加终止溶液50μl，终止反应（此时蓝色立转）。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8.用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度（OD值）。在加终止液后15分钟以内进行检测。
牛可溶性内皮糖蛋白(ENG)ELISA试剂盒
ELISA90分钟一步法的优点主要包括：1.操作简单：该只需要一步操作即可完成，操作简单明了，易于。2.快速：ELISA90分钟一步法可以在短时间内完成，适合于大批量样品的快速检测。3.特高：该采用特定的或抗原进行固定和检测，因此具有较高的特。4.灵敏度高：ELISA90分钟一步法具有较高的灵敏度，可以检测出较低浓度的抗原或。5.重复性好：该的重复性，结果较为。6.安全性高：ELISA90分钟一步法不使用放射性同位素等有害，因此具有较高的安全性。需要注意的是，ELISA90分钟一步法也存在一些缺点，例如可能会受到非特因素的影响，结果不准确。此外，该的试剂成本较高，不适合于小规模样品的检测。
标本的采集及保存：
：全血标本请于室温放置2小时或4℃过一晚后于1000 x g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
：可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于2 - 8° C 1000 x g离心15分钟，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
细胞物上清或其它生物标本：1000 x g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。 (注：标本溶血会影响**检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。)
标本的稀释原则：通过文献检索的了解待测样本的大致含量，确定适当的稀释倍数。只有稀释至曲线的范围内，检测的结果才是准确的。稀释的中，应做好详细的记录。计算浓度时，稀释了“N”倍，标本的浓度应再乘以“N”。
品的稀释原则：2瓶，每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml，盖好后静置10分钟以上，然后反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为300 pg/ml，做系列倍比稀释后，分别稀释300 pg/ml，150 pg/ml，75 pg/ml，37.5 pg/ml，18.5 pg/ml，9 pg/ml，4.5 pg/ml，样品稀释液直接作为浓度0 pg/ml，临用前15分钟内配制。 如配制150 pg/ml品：取0.5ml（不要少于0.5ml）300 pg/ml的上述品加入含0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
生物素标记的稀释原则：临用前以生物素标记稀释液稀释，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制（每孔100μl），实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl生物素标记加990μl生物素标记稀释液的比例配制，轻轻混匀，在使用小时内配制。
辣根过氧化物酶标记亲和素的稀释原则：临用前以辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液稀释，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制（每孔100μl），实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根过氧化物酶标记亲和素加990μl辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 的比例配制，轻轻混匀，在使用小时内配制
注意事项：
1.当混合蛋白溶液时应尽量轻缓，避免起泡。
2.洗涤非常重要，不充分的洗涤易造成假阳性。
3.一次加样时间**控制在5分钟内，如标本数量多，建议使用排枪加样。
4.请每次测定的同时做曲线，做复孔。
5.如标本中待测含量过高，请先稀释后再测定，计算时请乘以稀释倍数。
6.在配制品、检测溶液工作液时，请以相应的稀释液配制，不能混淆。
7.底物请避光保存。
8.不要用其它生产厂家的试剂替换试剂盒中的试剂。
试剂盒性能
1．准确性：品线性回归与预期浓度相关系数R值，大于等于0.9900。
2．灵敏度检测浓度小于10 pg/ml。
3．特：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4．重复性：批内与批见应分别小于9%和15%。
主营产品: ELISA试剂盒,ELISA检测试剂盒,标准品,生化试剂
上海笃玛生物科技有限公司是一家从事生物学试剂及试剂盒的生物企业。 总部位于上海，并在全国设有经销或代理机构。产品因可靠而稳定的质量和较为完善的售后服务确立了“笃玛生物”良好的品牌形象。公司秉承“以客户为中心、以产品为保障、以诚信为基础、以创新为宗旨”的发展理念，拥有的研发和质量检测团队以及的仓储和物流系统。“笃玛生物”已经得到全国科研工作者的认可，成为广大经销商推崇的品牌。 公司拥有一批的研发人员，我们专注于生物产品的不断完善和创新。产品覆盖面广，品质可靠。先后开发了涵盖分子生物学、细胞生物学、学、生物医学等领域的多种试剂及试剂盒。同时，提供各种常规生化试剂，库存常备产品多达10000多种，可随时为广大科研工作者提供各类试剂。在质量方面，谨记公司信念：质量一切。所有研发的产品都设有严谨的生产流程，科学的质量检测方法和成熟的质量检测程序，我们恪守对每一位用户的承诺：用的态度做的品牌。同时，公司组建了一支的技术服务队伍，能够为科研工作者提供的技术服务。每一位购买笃玛生物产品的用户都能够得到的咨询和完善的售后服务。
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