ELISA试剂盒为捕获抗体具有高亲和力、高特异性、低内毒素的单抗,研究者以刺激剂激活细胞时,不会影响活化细胞分泌细胞因子。ELISA试剂盒的原理是什么?
到目前为止,ELISA法仍在研究当中占有着主流地位,普遍应用使得实验更加方便、经济和准确, ELISPOT技术的优点也决定了它的发展潜力。LISPOT法来源于ELISA,相比较传统的ELISA法有所突破,是定量ELISA技术的延伸和发展。由于游离的循环抗体或CK的半哀期不同,使之在体液中不断的被代谢或与靶器官结合,传统的酶联吸附法(ELISA法)不能确切的反映体内的抗体及CK的水平。
ELISA试剂盒的原理包括了可以提了两款改良型siRNA用于活体转染。可以增加siRNA-转运试剂复合体的稳定性。而SIRNAPLUS则不需要转运试剂,其转运载体就整合在siRNA分子上。为了解决这一问题,公司开发了一个试剂盒,可以将shRNA插入到基因组的特定位置。这一靶向整合试剂盒采用锌指核酸酶技术,将 shRNAELISA试剂盒插入到人类基因组的AAVS1位点。这一技术将shRNA定位在一个地方,使影响shRNA表达水平的一个重要变量固定下来。
ELISA试剂盒普遍用作非放射性同位素的成键化验。在这种方法中,通常标准配体是固定的,通过加入溶液相受体或蛋白质来使之成键。通过加入与受体特异性反应的抗体来定量成键的受体,而且一开始抗体的量以加入第二种能显色的抗体测量。第二种抗体能识别抗体的末端,在其末端的碱性磷酸酯或过氧化物酶等与酶发生反应,从而使溶液显色。
ELISA试剂盒组成:
试剂盒组成48 孔配置96 孔配置保存
说明书1 份1 份
封板膜2 片(48)2 片(96)
密封袋1 个1 个
酶标包被板1×481×962-8℃保存
标准品:540μg/L0.5ml×1 瓶0.5ml×1 瓶2-8℃保存
标准品稀释液1.5ml×1 瓶1.5ml×1 瓶2-8℃保存
酶标试剂3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存
样品稀释液3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存
显色剂 A 液3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存
显色剂 B 液3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存
终止液3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存
浓缩洗涤液(20ml×20 倍)×1 瓶(20ml×30 倍)×1 瓶2-8℃保存
ELISA试剂盒:准备与贮存
ELISA试剂盒收到后立即贮存于2-8℃下,效期见试剂盒标签;所有成分在2-8℃下可保存至有效期。使用前,所有试剂平衡至室温,不同批次的试剂不能交换使用。
1. 包被板,96孔,包被了抗人胎球蛋白A抗体;微孔板固定于板架上,密封于含有干燥剂的铝箔密封袋内;贮存于2-8℃至有效期。
2. 胎球蛋白A示踪抗体,1瓶,0.6 ml,浓缩,HRP标记的抗人胎球蛋白A示踪抗体溶于稳定的蛋白基质中;此试剂使用前需用示踪剂抗体稀释液进行稀释;贮存于2-8℃至有效期。
3. 示踪抗体稀释液,1瓶,11ml,即用,Trizma盐酸溶于缓冲液;根据实验步骤用于示踪抗体稀释;贮存于2-8℃至有效期。
4. 试验缓冲液,浓缩,1瓶,11ml,含牛血清白蛋白的磷酸缓冲盐;建议使用前以1:10比例用双蒸水稀释(如11 ml浓缩+99 ml的双蒸水);贮存于2-8℃至有效期。
5. 洗涤液,浓缩,1瓶,20ml,30倍浓缩;试验前需用580ml的双蒸水稀释,混匀;一旦稀释,不含叠氮化物防腐剂的磷酸缓冲盐洗涤液会含表面活性剂;稀释的洗涤液在室温下可保存至效期。
6. HRP底物液;1瓶,12ml,含过氧化氢的TMB底物液;贮存于2-8℃至有效期。
7. 终止液,1瓶,12ml,0.5M硫酸,贮存于2-8℃至有效期。
8. 胎球蛋白A标准品,5瓶,含胎球蛋白A,不含叠氮化物防腐剂的液态牛血清基质;各标准品浓度见瓶子标签;3次冻存周期使用后,所有标准品保存至-20℃或更低。
9. 胎球蛋白A质控,2瓶,含人胎球蛋白A,不含叠氮化物防腐剂的液态牛血清基质,各质控的浓度范围见瓶子标签,3次冻存周期使用后质控保存至-20℃或更低。
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