笔迹鉴定，是指对人通过书写活动形成的字迹进行的鉴认、识别活动。人的书写习惯具有特定性和稳定性，并在笔迹中得到反映。通过对笔迹的检验，可判明文件中的笔迹由几个人所写，是否由某人所写，利用笔迹进行人身同一认定，证实文件的真伪。
进行笔迹鉴定时要了解案件有关情况，明确鉴定要求，査验笔迹物证和笔迹样本；分析判断笔迹是否正常，有无伪装或由于其他原因引起的变化；选择能反映书写人书写习惯的稳定的和带有特殊意义的特征；对检材和样本中找出的特征进行比较，找出符合点和差异点；对符合点和差异点的形成原因综合评断;做出鉴定意见并制做鉴定书。
笔迹鉴定仅仅凭借肉眼与经验识别，其可靠性有很大的局限性，也存在困难并很难形成说服力，现在行业内都通过辅助性的便携式视频显微镜来进行现场 识别!如Anyty的MSA200\WM401TV等显微镜识别可把微小的东西放大，在100-200倍率左右就可很清晰看到宣纸的材质、墨迹的深浅力度等信息，在显微镜下一目了然。
笔迹检验的对象是案件中的各种笔迹物证。笔迹检验是在研究认识个人书写习惯的基础上，对两部分笔迹进行比较鉴别，以确定它们是否为一人所写的检验过程。通过笔迹检验可以证明：物证笔迹是否为某人所写；几起案件中的物证笔迹是否为一人所写；一份物证笔迹材料中的几个部分是一人所写还是多人所写。
笔迹鉴定机构需要对检材和样本的字迹进行比较分析，制作《笔迹特征对比表》，对检材与样本字迹反映出的笔记特征的异同情况、变化范围、变化程度、变化形成原因等逐一分析比对。一般的比较方法有：直接目测比较、现为观察比较、用测量工具或软件进行测量比较、重合比较、运用统计学原理和方法进行异同情况的统计分析。
笔迹鉴定需要查验物证笔迹是否清晰完整，有无检验条件。凡具有检验条件的虽然检验条件差些也要尽可能利用现有条件予以鉴定，而对那些字数很少又模糊不清确已失去检验条件的可以不予受理。
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