产品名称:碱性蛋白胨水管(10ml)
货号:LZ-PYJ3412
英文名称:Alkaline peptone water
产品规格:10mL*20/盒
用途:用于弧菌的选择性增菌培养
主要包括:
计算—称量—溶解—调pH—分装—灭菌——倒平板等。
计算:,根据配方计算各种营养成分的用量。
称量:使用电子天平准确称取所需,遵循由含量低到含量高的称量原则。
溶解:将称好的成分放入相应玻璃容器中,加入所需量的水,加热使其完全溶解。对于液体培养基,建议使用纯化水。若配制固体培养基,则需称取适量的琼脂放进已称量好的培养基中,继续加热至琼脂全部溶解。
调pH值:待培养基稍冷却后,按配方要求调整pH值。使用10% NaOH溶液(或10% HCl溶液)调整所配培养基的pH。加碱(或酸)溶液时,应边滴加边搅拌,直至后调至要求的pH值。
分装:根据需要将培养基分装于不同的三角烧瓶、试管等。分装的量不宜超过容器的2/3以免灭菌时外溢。分装量根据使用目的和要求决定,但定量分装,便于应用。
灭菌:应按培养基配方中规定的条件及时进行灭菌。普通培养基采用121℃、15min高压湿热灭菌法,以灭菌效果和不损伤培养基的有效成份。
倒平板:灭菌后取出的固体培养基,根据需要可将试管立即斜放,冷凝后即成斜面培养基。液体培养基冷却后可直接根据需要接进菌种。
此外,还包括一些注意事项和操作细节,如使用度1/100的电子天平称取、避免使用铜或铁的容器溶化培养基、调整pH时考虑高压灭菌后的pH变化等。
1、上海准备好干粉培养基、三角瓶、药勺、无菌平皿、油性笔等。在瓶身上标注好培养基的
相关信息。
2噬菌体MS2液体培养基、将三角瓶置于电子天平上,调零。按照需要用量,用药勺把干粉培养基添加到三角瓶中。
3、培养基称量之后及时盖上培养基瓶盖,拧紧。用量筒量取适量的蒸馏水或者去离子水。
4、先加入小部分水以湿润干粉,避免粉尘扬起。再加入剩余的水量。充分摇匀。
5、将培养基加热煮至沸腾三次,应可见溶液澄清透亮,无明显琼脂颗粒挂壁,分层等现象。
6、塞上透气硅胶塞,包上牛皮纸或者报纸,包扎好。放入高压灭菌锅中灭菌。(按需设定灭
菌温度、时间)
7、暂时不使用的培养基,可以放入50℃烘箱或者水浴中保温。倒平板时,在超净工作台或
生物安全柜中准备好无菌平皿、记号笔等。
8、颗粒培养基拆开包装后,将无菌培养皿倒置,在底部边缘写上平板相关信息。
9、将标记好的无菌平皿翻转过来,当培养基温度下降到50℃左右时,倾倒培养基。
10、倒完后可轻轻圆周摇晃平板三圈,使平板边缘整齐。将平板铺开可加速琼脂冷却凝固。
11、使用之前,将平板倒置于无菌实验室内的烘箱中,55℃、15 分钟。烘干平板表面水分。
12、将暂时不使用的平板用报纸包成筒状,用记号笔标清楚平板的种类、配制日期。
13、然后放进2-8℃的冰箱中保存。用时取出放置室温下平衡,使用前50℃烘箱烘10 分钟。
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