DMEM高糖培养基(无谷氨酰胺、无钙离子)
货号:LZ-PYJ5228
英文名称:DMEM, high glucose, no glutamine, no calcium
产品规格:500mL
Dulbecco的改良Eagle培养基—DMEM(Dulbecco's Modified Eagle Medium)是一种广泛使用的基础培养基,适用于多种哺乳动物细胞培养,包括原代成纤维细胞,神经元,神经胶质细胞,HUVEC和平滑肌细胞,以及HeLa,293,Cos-7和PC-12等细胞系。DMEM是在MEM培养基的基础上研制的,与MEM培养基相比,氨基酸的含量增加了2倍,增加了4倍,同时还增加了非氨基酸、微量铁离子以及酸钠。
DMEM培养基初设计为含量1000mg/L的低糖型,后来又发展出含量为4500mg/L的高糖型,现已广泛应用于各种细胞的培养。DMEM高糖型普遍应用于生长快、粘附性低的细胞、杂交瘤的骨髓瘤细胞、克隆细胞、DNA转染的转化细胞、原代病毒宿主细胞、单一细胞的培养以及的生产,例如利用CHO细胞表达EPO和生产乙肝。
L-是细胞培养液体环境中所必需的一种营养成分,但其在水溶液中不稳定,易降解。不含L-的培养基,可以根据研究需求,自行调整L-的含量,在使用前添加新鲜的L-或其替代物更利于细胞的生长。
产品组分
DMEM高糖培养基(无、无钙离子) 500mL
说明书 1份
保存:2~8℃,避光,有效期一年。
配制过程中的常见问题分析:
01 培养基颜色不正确
(1)DMEM高糖培养基含有酸碱指示剂的培养基,若颜色不正确,通常是由于pH不正确导致的,加热过度、错误的灭菌方式等都会导致此项问题。
(2)加热过度导致某些成分分解或糖焦化,如SC培养基(SC增菌液)加热过度会变红,含糖量高的培养基,加热过度通常会出现颜色加深,呈焦糖色或棕褐色。
(3)某些成分变质,如血液久置易变黑,制成的平板颜色偏棕黑色。
02 培养基不凝固或凝固性差
(1)颗粒培养基称量错误
(2)培养基琼脂分布不均匀
(3)培养基pH不正确
(4)加热过度
(5)琼脂量不足
03 培养基产生沉淀
(1)某些培养基原本就含有不溶性沉淀,如TTB,MC培养基等,配方中含有大量不溶性碳酸钙。
(2)灭菌前未充分溶解,若灭菌前溶解不充足,灭菌后就会出现大量沉淀。
(3)pH不正确,偏酸或偏碱都有可能使培养基中的部分金属离子产生沉淀。
(4)水的纯度不够,天然水中含有较多的矿物盐离子,若未除净,则易与培养基中反应生成沉淀。
(5)添加剂加入温度不正确,卵黄、血液等对温度敏感的添加成分,若加入时温度过高或温差过大,易出现凝块。
(6)称量错误。
(7)试剂加入顺序不正确。
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注意事项:
1)培养基尽量使用新鲜培养基,2~4h内用完;
2)上海应使用预还原培养基,预还原24~48h更好;
3)可采用预还原灭菌法制作的培养基(用前于培养基中加入还原剂,如L-半胱氨酸、维生素C等,尽可能使预还原剂处于还原状态);
4)液体培养基应煮沸10min,以驱除溶解氧,并迅速冷却,立即接种医。学教育网搜集整理;
5)厌氧菌的培养基均应营养丰富,并加有还原剂与生长刺激因子(血清、维生素K、氯化血红素、聚山梨酯-80等)。
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