兔识别颗粒(SRP9)ELISA试剂盒
标记：良好的酶结合物取决于两个条件：即价的和高活性的酶。的活性和纯度对制备标记至关重要，因为特反应随活性和纯度的而增强。在酶标记中，的活性有所，故需要纯度高、效及抗原亲和力强的球蛋白使用亲和层析提纯的，可性，而且可稀释使用，非特吸附。
自从Engvall和Perlman(1971）报道建立酶联吸附试验（Enzyme-Linked ImmunosorbentAssays,ELISA）以来，由于ELISA具有快速、、简便、易于化等优点，使其迅速的发展和广泛应用。尽管早期的ELISA由于特不够高而妨碍了其在实际中应用的步伐，但随着的不断改进、材料的不断更新，尤其是采用基因工程制备包被抗原，采用针对某一抗原表位的单克隆进行ELISA试验，都大大了ELISA的特，加之电脑化程度的ELISA检测仪的使用，使ELISA更为简便实用和化，从而使其成为广泛应用的检测之一。如今ELISA已被广泛应用于多种和等的诊断。在动物检疫方面，ELISA在猪传染性胃肠炎、牛副结核病、牛传染性鼻气管炎、猪伪、蓝舌病等的诊断中已为广泛采用的。
ELISA试剂盒在国内有许多种叫法,例如:ELISA检剂盒、ELISA Kit、酶联试剂盒、酶联吸附测定试剂盒、酶联分析试剂盒、酶剂盒等,比较常见的叫法是ELISA检剂盒、酶联吸附测定试剂盒等。
ELISA试剂盒自从60-70年代问世以来,全 科研工作者的认可及推崇,在欧美及很大的推广,尤其是国内生化领域的长足发展。
Elisa生物试验是一种性高,特强,重复性好的实验诊断。由于其试剂、易保存,操作简便,结果判断较客观等因素,已广泛应用在学检验的各领域中。ELISA检剂盒适用于体外定性检测人或中的抗人类(HEV) IgM ELISA检测。
ELISA检剂盒应用定性夹心检测技术,用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板条,这些多肽是型HEV毒株核心酸序列中抗原性很强的肽段,分别来自于该毒株的开放阅读框2和开放阅读框3。将样品或品加入孔中并孵育,如果其中存在HEV IgM,这些就会与HEV 的多肽抗原结合,并固定在上面,洗板除去其它非特和样品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP(辣根过氧化物酶)酶结合物,经 次孵育后,酶结合物就会与 次孵育结合上的HEV IgM相结合,洗板除去未结合的酶结合物,加入TMB底物溶液,在第三次孵育时会发生酶-底物反应,只有那些含有HEV IgM和酶结合物所形成的复合物的孔才会发生颜色变化,加入溶液终止酶和底物间的反应,并在波长: 450nm处测量O.D.值,按照本HEV IgMelisa试剂盒的, O.D.值大于或等于Cut-Off值的样品被认为是初试阳性。
用途:
ELISA的基础是抗原或的固相化及抗原或的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或仍保持其学活性,酶标记的抗原或既保留其学活性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的或抗原)与固相载体表面的抗原或起反应。用洗涤的使固相载体上形成的抗原复合物与中的其他分开。再加入酶标记的抗原或,也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,间接地放大了反应的结果,使测定达到很高的度。 ELISA可用于测定抗原,也可用于测定。
然而,影响Elisa试验结果的因素很多,故加强各个环节的才能充分发挥其学的优点。
产品特点:
一、、灵敏、特异的;
二、的重复性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底度高的固相载体;
四、适用、、组织匀浆液、细胞上清液、等等多种标本类型;
五、节省实验经费。
elisa试剂盒回收率是反应待测物在样品分析中的损失的程度,损失越少,回收率越高,如果作标液1PPM,就是1毫克/升,而作出数据为0.99毫克/升,就是说你的回收率是99%,这个与真实成分有密切的关系,说明的准确度。比如水中总无机氯含量测定,样品水中含有无机氯20mg/L,取100mL被测水样品,加入0.1mL浓度为10mg/mL的含无机氯样品,测定时忽略体积变化,如果测定出样品中无机氯为29.8mg/L,则认为回收率为99%。
操作步骤：1.从室温平衡 20min 后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回 4℃。2. 设置品孔、样本孔和空白孔，空白孔什么都不加；品孔各加不同浓度的品 50μL；3. 待测样本孔先加待测样本 10μL，再加样本稀释液 40μL；4. 随后品孔和样本孔中（空白孔不加）加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测 50μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育 60min。5. 弃去，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置 1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗 板 5 次（也可用洗板机洗板）。6. 所有孔加入底物 A、B 各 50μL，37℃避光孵育 15min。7. 所有孔加入终止液 50μL，15min 内，在 450nm 波长处测定各孔的 OD 值。
ELISA （Enzyme-Linkedimmunosorbent assay）的基础是抗原或的固相化及抗原或的酶标记。这一的基本原理是：①使抗原或结合到某种固相载体表面，并保持其活性。②使抗原或与某种酶连接成酶标抗原或，这种酶标抗原或既保留其活性，又保留酶的活力。在测定时，把待测样本（测定其中的或抗原）和酶标抗原或按不同的步骤与固相载体表面的抗原或起反应。用洗涤的使固相载体上形成的抗原复合物与其他分开结合在固相载体上的酶量与标本中受检的量成一定的比例。加入酶反应的底物后，底物被酶催化变为有色产物，产物的量与标本中受检的量直接相关，所以可根据颜色反应的深浅定性或定量分析。由于酶的催化速率很高，所以可地放大反应效果，从而使测定达到很高的度。
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