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小鼠腹腔巨噬细胞

更新时间:2024-11-25 10:16:52 [举报]

小鼠腹腔巨噬细胞

基本属性:

细胞名称:小鼠腹腔巨噬细胞 

组织来源:腹腔液

商品货号:LZ-YX10007

种属来源:小鼠

产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶

细胞简介:

小鼠腹腔巨噬细胞分离自腹腔;腹腔,即躯干腹部的腔,内衬腹膜,由体壁、横膈膜和盆底围成,其内容纳胃、肝、胆囊、脾脏、胰、肾脏、肠、阑尾、膀胱、泌尿系和妇科(子宫、附件)等其他内官。巨噬细胞属细胞,有多种功能,是研究细胞吞噬、细胞和分子学的重要对象。巨噬细胞较易获得,便于培养,并可进行纯化。巨噬细胞属不繁殖细胞群,在条件适宜下可生活2-3周,多用做原代培养,难以长期生存。巨噬细胞(Macrophages)是一种位于组织内的白血球,源自单核细胞,而单核细胞又来源于骨髓中的前体细胞。巨噬细胞和单核细胞皆为吞噬细胞,在脊椎动物体内参与非特异性防卫(先天性)和特异性防卫(细胞)。它们的主要功能是以固定细胞或游离细胞的形式对细胞残片及病原体进行噬菌作用(即吞噬以及消化),并激活淋巴球或其他细胞,令其对病原体作出反应。巨噬细胞功能及其在疾病发生过程中的作用是目前研究的热点问题之一;腹腔巨噬细胞的吞噬、和分泌作用都十分活跃,有重要防御功能。

培养基:含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率:每2-3天换液一次

生长特性:贴壁

细胞形态:巨噬细胞样

传代特性:属于终末分化细胞;属于不增殖细胞群

消化液:利多卡因(12mM)

培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%


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使用方法:

小鼠腹腔巨噬细胞是一种贴壁细胞,细胞形态呈巨噬细胞样,在技术部标准操作流程下,细胞属于终末分化细胞;属于不增殖细胞群;建议您收到细胞后尽快进行相关实验。

客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作。

1. 取出T25细胞培养瓶,用75%消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。

小鼠腹腔巨噬细胞规格2. 贴壁细胞消化

1)吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;

2)添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃温浴1-3min;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml完全培养基终止消化;

3)用吸管轻轻吹打混匀,按传代比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的完全培养基至5mL,置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;

4)待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。          

小鼠腹腔巨噬细胞品牌3. 细胞收货脱落

1)收集所有细胞悬液,1000rpm,离心5min,保留沉淀;

2)添加0.25%胰蛋白酶消化液0.5mL至离心管中,重悬沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱静置5-7min);消化完向离心管内加入5ml完全培养基终止消化;

3)经1000rpm,离心5min,丢弃上清,用5ml完全培养基(补加1%FBS,促进贴壁)重悬沉淀,接种于新的培养瓶内;

4)待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基(37℃预热)。

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原代细胞试用的实验类型:

上海前面我们了解了原代细胞获取和培养过程中应该注意的一些细节,这有助于我们培养我们的原代细胞。那么原代细胞培养好后,它可适用哪些研究呢?

原代细胞不仅广泛应用于分子、细胞生物学和生物医学基础研究,如蛋白质组学、基因组学、细胞株(系)研究、DNA,RNA和遗传学研究等,还可应用于当今热门的生物医药产业如药物筛选、药物代谢和毒理研究、癌症药物的研究等。在这些应用中几乎都涉及了几个常见的且基础的细胞实验,如下:

一、细胞增殖检测:

常见检测方法:CCK8检测法 ,MTT检测法,Brdu检测法,Edu检测法,平板克隆形成

二、细胞周期检测

常见检测方法:流式检测细胞周期,标记有丝分裂百分率法

三、细胞凋亡检测

常见检测方法:流式检测细胞凋亡,线粒体膜电位,活性氧检测,Hoechst染色,电镜,TUNEL

四、细胞转移能力检测

常见检测方法:细胞划痕实验,Transwell实验,Invasion实验

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