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绵羊唾液酸乙酰酯酶(SIAE)ELISA试剂盒

更新时间:2024-11-25 09:38:54 [举报]


绵羊唾液酸乙酰酯酶(SIAE)ELISA试剂盒



ELISA检剂盒应用定性夹心检测技术,用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板条,这些多肽是型HEV毒株核心酸序列中抗原性很强的肽段,分别来自于该毒株的开放阅读框2和开放阅读框3。将样品或品加入孔中并孵育,如果其中存在HEV IgM,这些就会与HEV 的多肽抗原结合,并固定在上面,洗板除去其它非特和样品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP(辣根过氧化物酶)酶结合物,经第二次孵育后,酶结合物就会与次孵育结合上的HEV IgM相结合,洗板除去未结合的酶结合物,加入TMB底物溶液,在第三次孵育时会发生酶-底物反应,只有那些含有HEV IgM和酶结合物所形成的复合物的孔才会发生颜色变化,加入溶液终止酶和底物间的反应,并在波长: 450nm处测量O.D.值,按照本HEV IgMelisa试剂盒的, O.D.值大于或等于Cut-Off值的样品被认为是初试阳性。






 产品特点



 



一、、灵敏、特异的;



二、的重复性和可靠性;



三、吸附性能好,空白值低,孔底度高的固相载体;



四、适用、、组织匀浆液细胞上清液、等等多种标本类型;



五、节省实验经费。



 



制备:





包括以下步骤:



(1)抗原表位的计算机筛选;



(2)抗原的制备;



(3)的采集;



(4)间接ELISA的建立;



(5)间接ELISA的和特验证;



(6)试剂盒的性验证;



(7)对屠宰场进行临床检测。该简单、快速、灵敏度高、特强、性合格、重复性好。应用本发明制得的试剂盒能有效检出感染猪的戊型,适用于大批量发病样本的检测,可用于猪戊肝的快速诊断,并预防、控制流行和由猪向人传播。






elisa试剂盒回收率是反应待测物在样品分析中的损失的程度,损失越少,回收率越高,如果作标液1PPM,就是1毫克/升,而作出数据为0.99毫克/升,就是说你的回收率是99%,这个与真实成分有密切的关系,说明的准确度。比如水中总无机氯含量测定,样品水中含有无机氯20mg/L,取100mL被测水样品,加入0.1mL浓度为10mg/mL的含无机氯样品,测定时忽略体积变化,如果测定出样品中无机氯为29.8mg/L,则认为回收率为99%。



ELISA检剂盒应用定性夹心检测技术,用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板条,这些多肽是型HEV毒株核心酸序列中抗原性很强的肽段,分别来自于该毒株的开放阅读框2和开放阅读框3。将样品或品加入孔中并孵育,如果其中存在HEV IgM,这些就会与HEV 的多肽抗原结合,并固定在上面,洗板除去其它非特和样品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP(辣根过氧化物酶)酶结合物,经第二次孵育后,酶结合物就会与次孵育结合上的HEV IgM相结合,洗板除去未结合的酶结合物,加入TMB底物溶液,在第三次孵育时会发生酶-底物反应,只有那些含有HEV IgM和酶结合物所形成的复合物的孔才会发生颜色变化,加入溶液终止酶和底物间的反应,并在波长: 450nm处测量O.D.值,按照本HEV IgMelisa试剂盒的, O.D.值大于或等于Cut-Off值的样品被认为是初试阳性。





ELISA实验通用规则



1、要移液枪的准确性,误差不能超过2%。可用水和电子天平进行确定。有人员进行矫正。



2、要配备20ul、50ul、100ul、1000ul和排枪各一支。吸取不同的后,要更换枪头。即使是吸取品时。



3、要在实验前1小时将试剂盒从冰箱中取出,使各种试剂都恢复到室温,以使结果更。



4、实验时,要使底物避光保存。



5、用枪吸取时速度不能太快,以免产生气泡而使吸取量不准确。



6、吸取时,要用量程和需要量接近的枪去吸,误差。



7、将加到酶标孔中时,避免枪头和孔内,可使枪头上的液滴和孔壁,液滴会自然流下去。



8、全部加完后,可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒,混匀。也可以用酶标仪的晃动功能。



9、温浴时,要用不干胶或胶带纸封好酶标板,防止水分的蒸发。



10、洗板时,每次洗液加入后,应静置1分钟,使清洗更加。没有洗板机时,倒去后,要将酶标板在报纸或毛纸上拍干。



11、洗液不够时,可用蒸馏水自行配制PH7.4,0.02M的缓冲液,加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。



12、底物是光的,要在临用前现配。



13、检测前,要打开酶标仪,使之10分钟以上。



14、底物有一定的毒性,终止液对皮肤有腐蚀性,应尽量避免。



15、待检样品要澄清,否则会影响结果。



16、温浴时间应遵守试剂盒规定。



17、应尽量做双孔实验,这样才能数据的准确性。



18、对结果有疑问的样品要用其它进行确证。



 











 



 HBsAg试剂特点(检测:临床夹心法):包被为山羊多抗。多抗具有高亲和性和对抗原各种表位的反应性。酶表为与HBsAg有不同结合位点的鼠复合单位,可测得HBsAg变异样品,检测的特(99.98%)检测的灵敏度,应用Parl Ehrich 学说(PEI)HBsAg品,对ad品的灵敏度为0.05ng/ml对ay品灵敏度为0.025ng/ml




 

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